雖然 ÄKTA purifier 100的自動(dòng)化程度極高,但該儀器極易受外界因素的影 響甚**損壞,使用該儀器必須嚴(yán)格按使用規(guī)范和操作手冊(cè)進(jìn)行。
1、開機(jī)。確認(rèn)將 ÄKTA purifier 100主機(jī)與電腦電源連接在穩(wěn)壓電源輸出端。 先開 ÄKTA,后開電腦。
2、關(guān)機(jī)。確認(rèn)退出所有程序后,關(guān)閉電腦后關(guān)閉 ÄKTA purifier 100主機(jī)電 源。
3、所有流動(dòng)相和樣品均應(yīng)用 0.22 微米孔徑濾膜過濾,以防堵塞純化柱。 4、所有管路均應(yīng)保存在 20%乙醇中,防霉防菌。
15、系統(tǒng)泵循環(huán)洗滌管應(yīng)置于 20%乙醇中,定期更換,以保護(hù)泵頭。
基本操作
1、進(jìn)樣方法選擇
自動(dòng)運(yùn)行 Run/Instant Run——運(yùn)行預(yù)編好的方法 (Run) 或直接運(yùn)行模板
(Instant Run)。手動(dòng)運(yùn)行 Manual——利用手動(dòng)窗口 (Manual) ,手工執(zhí)行系統(tǒng)命 令。自動(dòng)加手動(dòng)——在自動(dòng)運(yùn)行過程中可同時(shí)執(zhí)行手動(dòng)命令如有沖突,以后執(zhí)行 的命令為準(zhǔn)。 2、方法編輯
編輯方法(Method Wizard, Run Setup, Text Instruction);編輯層析柱列表 (Column List);編輯緩沖液配方 (BufferPrep Receipt)。 3、運(yùn)行啟動(dòng)
自動(dòng)運(yùn)行;手動(dòng)運(yùn)行。 4、收集方式
收集器自動(dòng)收集樣品;手動(dòng)收集樣品;收集器自動(dòng)峰收集。 5、結(jié)果處理
文件管理;積分;曲線操作
6、結(jié)束實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,必須運(yùn)行系統(tǒng)泵管清洗后,才能關(guān)機(jī)。 操作實(shí)例——脫鹽
1、洗泵。更換樣品對(duì)應(yīng)的 buffer,運(yùn)行 pumpwash,25ml 約1.5min。 2、裝柱。調(diào)流速**1ml/mi,alarmpresure為 0.3 mpa。將進(jìn)水導(dǎo)管連接**柱 入水端,取下柱出水端堵頭,當(dāng)buffer 流出時(shí),將柱出水端接入固定架。 3、平衡柱子。調(diào)流速** 3ml/mi。用平衡buffer 清洗 loop 進(jìn)樣環(huán)。 4、上樣。用注射器取樣、排氣后推入loop 進(jìn)樣環(huán)。 2 3
5、調(diào)零。
6、數(shù)據(jù)保存設(shè)定。點(diǎn)擊Record on,注意本次即將運(yùn)行樣品后的數(shù)據(jù)保存的
位置,并注意運(yùn)行后及時(shí)將數(shù)據(jù)復(fù)制**安全位置,否則超過 10 個(gè)后,會(huì)被后續(xù) 運(yùn)行樣品數(shù)據(jù)覆蓋。
7、設(shè)定樣品收集方式。主要有收集器自動(dòng)收集樣品、手動(dòng)收集樣品、收集 器自動(dòng)峰收集等,根據(jù)樣品和個(gè)人喜好確定。
8、進(jìn)樣運(yùn)行。點(diǎn)擊 inject 運(yùn)行,注意收集器是否運(yùn)行。