1.一種常溫保存核酸擴(kuò)增試劑的方法，其特征在于，將核酸擴(kuò)增試劑中的部分試劑或全部試劑，通 過固化工藝轉(zhuǎn)變?yōu)楣虘B(tài)，從而實(shí)現(xiàn)核酸擴(kuò)增試劑能在常溫下穩(wěn)定保存，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)核酸檢測(cè)試劑盒在常溫下 穩(wěn)定保存。 

  2.如權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，所述的常溫是指在9～45℃的溫度范圍內(nèi)，所述的穩(wěn)定保存 是指**少保存3個(gè)月后，各試劑的生物、物理和化學(xué)等性能變異系數(shù)CV小于10%。 

  3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述核酸擴(kuò)增試劑包括如下組分： 

  組分A：核酸擴(kuò)增試劑中能在常溫液態(tài)和固態(tài)下穩(wěn)定保存的組分，包括：水、Tris-HCl，MgSO4，甜 菜堿，(NH4)2SO4，NaCl，MgCl2，曲拉通； 

  組分B：核酸擴(kuò)增試劑中在常溫液態(tài)下不一定穩(wěn)定而在常溫固態(tài)下能穩(wěn)定保存的組分，包括：脫氧核 苷三磷酸，引物、探針或其他核苷酸序列以及帶小分子標(biāo)記的引物、探針或其他核苷酸序列； 

  組分C：核酸擴(kuò)增試劑中在常溫液態(tài)下不穩(wěn)定而在固態(tài)下穩(wěn)定的組分，包括：Taq DNA聚合酶、Tth DNA 聚合酶、Vent DNA聚合酶、Pwo DNA聚合酶、Pfu DNA聚合酶、Bst DNA聚合酶、T7RNA聚合酶、 AMV逆轉(zhuǎn)錄酶、MMLV逆轉(zhuǎn)錄酶。 

  4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，實(shí)現(xiàn)核酸擴(kuò)增試劑的常溫下穩(wěn)定保存，**少需要固化 所述組分C，將所述組分A和所述組分B以液態(tài)形式穩(wěn)定儲(chǔ)存；或者，同時(shí)將組分B和組分C固化，將 組分A以液態(tài)形式保存；或者，同時(shí)將組分A、組分B和組分C全部固化，整個(gè)核酸擴(kuò)增試劑以固體形 式在常溫穩(wěn)定保存。 

  5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述固化工藝是指液態(tài)的核酸擴(kuò)增試劑組分在固化保護(hù) 劑的存在下，通過物理干燥脫水的工藝變成固體；所述物理干燥脫水的工藝，包括：真空抽干工藝、冷凍 真空干燥工藝和烘干工藝。 

  6.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述固化保護(hù)劑，包括糖、蛋白、表面活性劑、抗氧化 劑和防腐劑；所述糖，包括雙糖和多糖，其使用的終濃度為體積比的0.5～20%；所述蛋白，包括動(dòng)物血清 與動(dòng)、植物蛋白，其使用的終濃度為體積比的0.1～15%；所述的表面活性劑包括離子和非離子的表面活性 劑，其使用的終濃度為體積比的0.01～5%；所述的抗氧化劑，包括維生素、超氧化物歧化酶，其使用的終 濃度為體積比的0.01～5%；所述的防腐劑，包括疊氮鈉、硫柳汞、Proclin300，其使用的終濃度為體積比 的0.001～0.1%。   7.一種常溫保存的封閉式核酸層析試紙檢測(cè)試劑盒，其特征在于：包括樣本的核酸提取試劑、能在 常溫下保存的核酸擴(kuò)增試劑和封閉式層析試紙檢測(cè)裝置；所述封閉式核酸層析試紙檢測(cè)試劑盒是指在封閉 式層析試紙檢測(cè)裝置中對(duì)常溫保存的核酸擴(kuò)增試劑的擴(kuò)增產(chǎn)物溶液通過免疫層析試紙實(shí)現(xiàn)快速檢測(cè)； 

所述核酸擴(kuò)增試劑采用權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的方法進(jìn)行常溫保存； 

所述封閉式層析試紙檢測(cè)裝置，包括：免疫層析試紙和封閉式檢測(cè)裝置；其中免疫層析試紙被固定在 封閉式檢測(cè)裝置中，被檢測(cè)樣品溶液不能同裝置外部環(huán)境接觸。 

  8.如權(quán)利要求7所述的試劑盒，其特征在于，所述核酸擴(kuò)增試劑的檢測(cè)目標(biāo)對(duì)象包括：RNA和DNA； 所述核酸擴(kuò)增試劑用于從DNA或RNA模板啟動(dòng)核酸序列的擴(kuò)增，**終產(chǎn)生遠(yuǎn)高于模板起始濃度的且與模 板互補(bǔ)或相同序列的RNA或DNA片段產(chǎn)物，核酸擴(kuò)增反應(yīng)方法包括：聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈 式反應(yīng)、鏈替代擴(kuò)增、連接酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、依賴核酸序列的擴(kuò)增、滾環(huán)擴(kuò)增、轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)擴(kuò)增、實(shí)時(shí)熒光定量 環(huán)介導(dǎo)恒溫?cái)U(kuò)增。 

  9.如權(quán)利要求7所述的試劑盒，其特征在于：所述的封閉式層析試紙檢測(cè)裝置由溶液管，連接管和 試紙管裝配組成： 

  1）溶液管：用于儲(chǔ)存核酸擴(kuò)增試劑和采用核酸提取試劑提取的DNA或RNA進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)；該溶液 管包括溶液管體和溶液管蓋子；所述溶液管管體內(nèi)壁圓周面上設(shè)有上下兩個(gè)凹槽，分別是溶液管內(nèi)部** 凹槽、溶液管內(nèi)部第二凹槽；所述溶液管蓋子的外周設(shè)有凸起密封環(huán)，該溶液管蓋子外周凸起密封環(huán)與溶 液管內(nèi)部**凹槽、溶液管內(nèi)部第二凹槽都能配合密封，溶液管內(nèi)部**凹槽能允許溶液管蓋子重復(fù)開啟， 溶液管內(nèi)部第二凹槽則反向倒鉤住溶液管蓋子，使其在一次性受壓入位后形成封閉環(huán)境，不容易被再次打 開；所述溶液管管體外周設(shè)有溶液管外部凹槽，能與連接管對(duì)應(yīng)接口內(nèi)設(shè)的凸起密封環(huán)配合形成反向倒鉤 結(jié)構(gòu),形成封閉環(huán)境而不容易被打開；所述溶液管管體底部設(shè)有底部結(jié)構(gòu)，它外周邊緣設(shè)底部切痕，當(dāng)?shù)?部結(jié)構(gòu)受到一定作用力時(shí)，它從底部切痕處斷裂脫離，此時(shí)預(yù)先分裝在溶液管內(nèi)的樣品溶液能夠從斷裂縫 隙流出； 

  2）連接管：用于將溶液管和試紙管密閉連接起來，并促使釋放溶液管中的核酸擴(kuò)增反應(yīng)溶液；所述 連接管上設(shè)有一個(gè)或多個(gè)與所述溶液管下部管體外形匹配的沉孔形接口；所述沉孔形接口內(nèi)設(shè)有溶液管凸 起密封環(huán)，能與插入接口的溶液管外部凹槽配合形成反向倒鉤結(jié)構(gòu)，形成封閉環(huán)境而不容易被再次打開； 該連接管上還設(shè)有一個(gè)或多個(gè)與試紙管匹配的接口，該接口內(nèi)設(shè)有試紙管凸起密封環(huán)，該試紙管凸起密封 環(huán)與插入接口的試紙管外部凹槽配合成反向倒鉤密封結(jié)構(gòu)而不容易被打開；連接管沉孔形接口底部設(shè)有溶 液釋放結(jié)構(gòu)，它對(duì)溶液管底部結(jié)構(gòu)給予特定作用力即可將其斷裂脫離，溶液從溶液管釋放出來；連接管溶 液釋放結(jié)構(gòu)底部設(shè)有溶液通道，溶液管釋放出來的液體將經(jīng)過溶液通道流到試紙管中的層析試紙的樣品溶 液接收區(qū)； #p#分頁標(biāo)題#e#

  3）試紙管：用于固定免疫層析試紙；所述試紙管是一端開口的中空長管；試紙管的開口端設(shè)有試紙 管凸起卡槽，用于安裝免疫層析試紙條時(shí)卡住并固定免疫層析試紙條；試紙管在插入連接管的接口部位設(shè) 有試紙管外部凹槽，該外部凹槽與連接管內(nèi)壁設(shè)的試紙管凸起密封環(huán)配合后反向倒鉤形成封閉環(huán)境，不容 易被再次打開。 

10.如權(quán)利要求9所述的試劑盒，其特征在于：所述的封閉式層析試紙檢測(cè)裝置的溶液管的蓋子上設(shè) 有一沉孔形空腔，在該沉孔形空腔內(nèi)可插入另一個(gè)溶液管下部管體形成疊加套管結(jié)構(gòu)，并釋放出核酸擴(kuò)增 反應(yīng)的產(chǎn)物溶液，實(shí)現(xiàn)同時(shí)檢測(cè)多管擴(kuò)增完成的反應(yīng)液；所述溶液管蓋子的沉孔形空腔底部設(shè)有溶液釋放 結(jié)構(gòu)，溶液釋放結(jié)構(gòu)底部設(shè)有溶液通道；所述溶液管體下部外圓周面設(shè)有外部凹槽；靠近蓋子頂部的溶液 管蓋子內(nèi)壁面設(shè)有凸起密封環(huán)，該凸起密封環(huán)與插入蓋子沉孔形空腔內(nèi)的另一個(gè)溶液管的外部凹槽配合后 形成反向倒鉤密封結(jié)構(gòu)。 

11.如權(quán)利要求9所述的試劑盒，其特征在于：所述試紙管末端部位設(shè)有環(huán)形凹槽，在用力達(dá)到一定 程度時(shí)，能從此環(huán)形凹槽部分折斷試紙管，便于對(duì)檢測(cè)樣品進(jìn)行污染消除處理。 12.一種利用如權(quán)利要求7所述的試劑盒進(jìn)行核酸檢測(cè)的方法，其特征在于，包括如下步驟： （1）采用核酸提取試劑進(jìn)行核酸提取； 

a、取100～1000μl的液體樣本，加入300～4000μl裂解液，震蕩混勻后室溫靜置1～2min； b、加入350～4000μl洗滌液A，震蕩混勻后以10000～16000rpm離心3～5min，棄上清； c、加入350～1000μl的洗滌液B，震蕩洗滌使絮狀物溶解，隨后以10000～16000rpm離心1～2min， 棄上清，得沉淀； 

d、沉淀于室溫干燥，加入1-10μl的溶解液將沉淀溶解； （2）采用核酸擴(kuò)增試劑進(jìn)行DNA或RNA擴(kuò)增； 

  將核酸擴(kuò)增試劑中的液體試劑用移液槍或者一次滴管移**固體試劑的溶液管，充分溶解形成核酸擴(kuò) 增反應(yīng)液；然后將1～10μl核酸提取試劑提取的DNA或RNA加入備好的核酸擴(kuò)增反應(yīng)液中，依照不同的 核酸擴(kuò)增方法進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)，隨后恢復(fù)室溫終止核酸擴(kuò)增； （3）利用核酸封閉式檢測(cè)裝置進(jìn)行DNA或RNA檢測(cè)： 

a.將試紙管連帶免疫層析試紙條插進(jìn)連接管與其匹配的接口中，密封不可拔出；b.將結(jié)束擴(kuò)增的溶液管插入水平放置的封閉式層析裝置的連接管中通過旋轉(zhuǎn)溶液管，溶液管底部凸起 斷裂脫落，繼續(xù)完全插入溶液管，使溶液管外部凹槽與**連接管凸起密封環(huán)配合形成倒鉤結(jié)構(gòu)，該溶液 管將被該倒鉤結(jié)構(gòu)反向頂住呈不可拔出且密封狀態(tài)； 

c.擴(kuò)增完的核酸擴(kuò)增反應(yīng)液由溶液管底部和呈打開狀態(tài)的連接管內(nèi)部的切痕片流到免疫層析試紙條 上，開始核酸的膠體金層析免疫學(xué)檢測(cè)； 

d.從液體出現(xiàn)在硝酸纖維素膜上起開始計(jì)時(shí)，3-15min后免疫層析結(jié)束判定結(jié)果，在質(zhì)控線有可見條帶 的前提下，檢測(cè)線出現(xiàn)條帶說明檢測(cè)結(jié)果為陽性，檢測(cè)線沒有條帶說明檢測(cè)結(jié)果為陰性。 

13.如權(quán)利要求12所述的方法，其特征在于，在步驟（3）之后增加如下核酸擴(kuò)增產(chǎn)物無害化處理步 驟：將使用完畢后的封閉式層析試紙檢測(cè)裝置在試紙管的環(huán)形凹槽處折斷，同時(shí)將溶液管蓋子沉孔形空腔 底部的切痕片頂壓破裂，然后把全部組件浸入納米二氧化鈦溶液中，然后在紫外光的照射下降解封閉式層 析試紙裝置中的核酸擴(kuò)增產(chǎn)物。 

14.如權(quán)利要求13中所述的方法，其特征在于，所述納米二氧化鈦包括：金紅石型、銳礦型，納米 二氧化鈦溶液的濃度為：0.5～5mg/ml；所述的紫外光波長范圍是200～420nm，照射時(shí)間為2～48小時(shí)。